Actividad
experimental 3, Quinta etapa
Digestión de la albúmina por “pepsina”
industrial
Preguntas generadoras:
1. ¿Cómo
actúa la pepsina sobre las proteínas?
Esta enzima rompe el enlace peptídico para que la
absorción de nutrientes se lleve a cabo en los seres vivos.
2. ¿Cómo
están formadas las proteínas?
Están constituidas por polímeros.
3. ¿Qué es la
pepsina?
La pepesina es una enzima que rompe el enlace
peptídico.
4. ¿Cuál es
el papel que desempeñan las proteínas del alimento, en los animales?
Son importantes ya que estas ayudan al buen
funcionamineto de los tejidos del cuerpo de los seres vivos.
5. ¿Por qué
es necesario que se digieran las proteínas del alimento?
Si estas no son digeridas, no se podrán degradar a
monomeros y por lo tanto no podrán ser abosorbidas por las células.
6. ¿Qué es la
hidrólisis de una proteína?
Se refiere a la fragmentación de las proteínas a
enlaces peptídicos.
7. ¿Qué papel
desempeña el ácido clorhídrico al actuar sobre la pepsina?
El ácido clorhídrico logra que la pepsina se convierta
en una enzima activa, para que pueda actuar sobre el enlace peptídico.
Planteamiento de las hipótesis:
Observaremos y
comprobaremos si la pepsina es una enzima, que rompe el enlace peptídico para
que la absorción de nutrientes se lleve a cabo en los seres vivos.
Las proteínas están
constituidas por polímeros, y estas ayudan al buen mantenimiento de los tejidos
del cuerpo de los seres vivos. Para esto es necesario que las proteínas se
digieran, para que se degraden a monómeros, y el cuerpo pueda absorberlos.
La hidrólisis de las
proteínas, es fragmentarlas en enlaces peptídicos, y es aquí cuando actúa la
pepsina sobre los enlaces.
Introducción
El jugo gástrico, elaborado por las
glándulas de la mucosa del estómago, contiene ácido clorhídrico libre y dos
enzimas: quimosina y pepsina. En realidad ambas son secretadas como proenzimas
inactivas, y en presencia del ácido clorhídrico se transforman espontáneamente
en enzimas activas.
Durante la digestión de las proteínas
(polímeros de aminoácidos) se hidrolizan los enlaces peptídicos de estas
moléculas. Este proceso se inicia en el estómago por acción de las pepsinas que
rompen las uniones (enlaces peptídicos) a
nivel de los aminoácidos fenilalanina y tirosina, de manera que los productos
de la digestión gástrica de las proteínas son polipéptidos de muy diversos
tamaños. La mayor parte de la digestión de proteínas se produce en el intestino
delgado, donde los productos de la digestión gástrica son hidrolizados hasta
aminoácidos, primero por la acción de las enzimas proteolíticas del jugo
pancreático y después por las enzimas asociadas a las células de las
microvellosidades.
Una reacción característica de los
polipéptidos es la reacción de Biuret, las proteínas y los aminoácidos no dan
positiva esta reacción
Objetivos:
·
Identificar la acción de la pepsina sobre las
proteínas
·
Identificar los productos de la acción de la
pepsina sobre las proteínas
·
Comprender la acción de los jugos gástricos en la
digestión química del alimento
·
Conocer cómo se puede activar una enzima
Material:
1 vaso de precipitados de 1000 ml
Papel filtro
1 embudo
1 probeta de 100 ml
1 gradilla
4 tubos de ensayo
4 probetas de 10 ml
Gasas
Material biológico:
Claras de huevo
Sustancias:
Ácido clorhídrico 0.1 N
Reactivo de Biuret
Pepsina
Equipo:
1 balanza granataria electrónica
1 parrilla con agitador magnético
Procedimiento:
Bate la clara de huevo cruda en un litro de
agua fría, y llévala hasta la ebullición, sin dejar de batir. Fíltrala. El
líquido que se obtiene es una fina suspensión, muy estable, de albúmina
desnaturalizada.
Prepara, por otro lado, jugo gástrico
artificial, diluyendo en 100 ml de agua, 1 g de jugo gástrico desecado, que se
vende en las farmacias bajo la denominación de “pepsina”, nombre que proviene
de la enzima principal que contiene.
Prepara en cuatro tubos de ensayo, las
siguientes mezclas:
1. 6 ml de
albúmina + 6 ml de agua.
2. 6 ml de
albúmina + 1,5 ml de agua + 4,5 ml de HCl, 0.1 N.
3. 6 ml de
albúmina + 1,5 ml de pepsina + 4,5 ml de agua
4. 6 ml de
albúmina + 1,5 ml de pepsina + 4,5 ml de HC1, 0.1 N.
A continuación coloca los tubos a baño
María, a 40° C. Algunos minutos más tarde, únicamente en el tubo 4 se producirá
un aclarado, esto es consecuencia de la actividad de la pepsina que, en medio
ácido, ha hidrolizado a la albúmina.
Resultados:
Contenido del tubo
|
Reacción Biuret
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Albúmina
+ agua
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Color morado
|
Albúmina
+ agua +ácido clorhídrico
|
Color aul
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Albúmina
+ pepsina + agua
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La soución es casí transparente
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Albúmina
+ pepsina +ácido clorhídrico
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Color rojizo
|
Análisis de resultados:
Elabora la caracterización de los siguientes
conceptos: proteína, hidrólisis, enlace peptídico, polipéptido, aminoácido,
digestión química, enzima activa, enzima inactiva.
- Proteína: Las proteínas son sustancias complejas
formadas necesariamente por los elementos: C, H, O, N, S y en algunos casos
fósforo. Son de alto peso molecular, forman dispersiones coloidales y estan
compuestas por L-alfa-aminoácidos en enlace peptídico, arreglados en secuencia
lineal que se desarrolla después para constituir cuatro niveles estructurales.
- Hidrólisis: La hidrólisis es una reacción ácido‑base
que se produce al disolver determinadas sales en agua. La reacción tiene lugar
entre uno de los iones de la sal y el agua y, hay que tener en cuenta que se
trata de una reacción de equilibrio.
- Enlace
peptídico: El
enlace peptídico es un enlace amida que se establece entre dos aminoácidos.
- Aminoácido: Los aminoácidos son compuestos orgánicos que se combinan para formar
proteínas. Los aminoácidos y las proteínas son los pilares fundamentales de la
vida.
- Digestión química: Es el proceso de la digestión en el que actúan las
enzimas para degradar las moléculas complejas a moléculas simples, y
posteriormente estas sean transportadas por las células que las absorbieron.
- Enzima activa: es aquella que reacciona inmediatamente con una molécula
compleja.
- Enzima inactiva: este tipo de enzimas son activadas por catalizadores
para que puedan reaccionar.
Replanteamiento de las predicciones de los
alumnos:
Pudimos comprobar que nuestra hipótesis fue acertada, ya
que se obtubieron los resultados que planteamos a cewrca d elas preguntas
generadoras.
Conceptos claves:
Digestión de proteínas, pepsina, sitio de producción de pepsina en el aparato
digestivo humano, sitio de hidrólisis total de las proteínas en el aparato
digestivo humano.
Relaciones.
Esta
actividad de laboratorio coadyuva a la construcción del concepto de digestión
química, en este caso, asociada con la degradación de las proteínas. Es
importante relacionar los órganos donde se inicia y termina esta hidrólisis.